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支原體瓊脂（Mycoplasma Agar）

用于選擇性分離支原體

貨號	產(chǎn)品描述	規(guī)格	可配制培養(yǎng)基	公開價
CM0401B	支原體瓊脂基礎(chǔ) Mycoplasma Agar Base	500g	14.1L	1490元
SR0059C	支原體添加劑G Mycoplasma Supplement G	10小瓶	每小瓶80ml	1126元

支原體瓊脂基礎(chǔ) CM0401

配方表：

成分*	含量 g/L
細(xì)菌學(xué)蛋白胨	10.0
牛肉浸粉（Lab-Lemco粉）	10.0
氯化鈉	5.0
礦物質(zhì)	0.5
瓊脂	10.0
pH 7.8±0.2 @25℃

 *可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)需要自行調(diào)整

支原體添加劑G SR0059C

配方表：

成分	每小瓶含量	每升培養(yǎng)基含量
馬血清	20.0ml	200.0ml
酵母粉(25% w/v)	10.0ml	100.0ml
乙酸亞鉈	25.0mg	250.0mg
青霉素	20000IU	200000IU

配制方法：

取35.5g的CM0401培養(yǎng)基到1L蒸餾水中，加熱溶解，分裝培養(yǎng)基，每瓶80ml，121℃滅菌15分鐘，冷卻到50℃，每瓶培養(yǎng)基加入1瓶已安裝說明書溶解的SR0059C。

肺炎支原體雙向培養(yǎng)基（Mycoplasma pneumoniae Bi-phasic Medium）

用于選擇性分離肺炎支原體

貨號	產(chǎn)品描述	規(guī)格	可配制培養(yǎng)基	公開價
CM0401B	支原體瓊脂基礎(chǔ) Mycoplasma Agar Base	500g	14.1L	1490元
SR0060C	支原體添加劑P Mycoplasma Supplement P 每瓶溶解至20ml，可配成10份的雙向培養(yǎng)基	10小瓶	每小瓶配10份	1762元

支原體添加劑P SR0060C

配方表：

成分	含量
馬血清	6.0ml
酵母粉(25% w/v)	3.0ml
乙酸亞鉈	0.008g
葡萄糖	0.3
酚紅	0.0012g
氯化亞甲基藍(lán)	0.0003g
青霉素	12000IU
支原體肉湯基礎(chǔ)CM0403	0.145g

配制方法：

往每瓶SR0060C中加入20ml無菌蒸餾水，混勻溶解。往10個小瓶中每個加入1ml的支原體瓊脂基礎(chǔ)，121℃滅菌15分鐘。在上述10小瓶培養(yǎng)基中分別加入2ml溶解后的支原體添加劑P，即SR0060C。 

產(chǎn)品描述：

Oxoid支原體瓊脂基礎(chǔ)是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基，加入合適的添加劑后，可以用來培養(yǎng)支原體。

Edward強調(diào)過在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入有毒物質(zhì)的重要性，Lynn & Morton對加入瓊脂培養(yǎng)基中的抑制劑也給予了特殊的重視。Oxoid的支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)不用含有有毒物質(zhì)和抑制劑，可以選擇性地添加它們，同時它含有的礦物質(zhì)優(yōu)化了菌落的生長性能，同時也不會干擾培養(yǎng)基的澄清度。

Hayflick建議在培養(yǎng)基中加入10% v/v的25% w/v的面包酵母提取物，Lemcke則用Oxoid酵母粉LP0021加入。大部分的支原體需要富含血清的培養(yǎng)基，常用的是馬血清(20% v/v)，豬或人血清可以替代馬血清，但是人血清里面的抗體和抗生素會對培養(yǎng)基產(chǎn)生重要的影響。Edward建議將DNA加入培養(yǎng)基可以促進(jìn)牛支原體和其他支原體的生長，在每升培養(yǎng)基中加入20mg脫氧核糖核酸鈉（引述自Lemcke）。

為了阻止污染微生物阻礙生長較慢的支原體的生長，抗菌物質(zhì)必須加入到培養(yǎng)基中。青霉素和乙酸亞鉈是最常用的試劑，但是T-strain支原體對乙酸亞鉈敏感。Hutchinson和 Fallon 報道說在培養(yǎng)基中加入1mg/ml的氨芐西林可以替代青霉素和乙酸亞鉈。青霉素的添加量應(yīng)該在50-500 units/ml，乙酸亞鉈的添加量應(yīng)該在1/2000到1/8000之間。如果要做T-Strain支原體的研究，就去除乙酸亞鉈。

兩種添加劑，支原體添加劑G SR0059和支原體添加劑P SR0060，可以優(yōu)化支原體的生長情況。支原體添加劑G SR0059是一種一般的添加劑，由Hayflick的配方而來， 當(dāng)加入到Oxoid支原體肉湯基礎(chǔ)或者支原體瓊脂基礎(chǔ)后，就組成完全選擇性培養(yǎng)基，促進(jìn)需要甾醇的支原體的生長。

支原體添加劑P是一種液體添加劑，由Mycoplasma Reference Laboratory, CPHLS, Colindale報道的配方而來，與Oxoid支原體瓊脂基礎(chǔ)一起使用，組成雙向培養(yǎng)基，用來分離和初步鑒定肺炎支原體。

許多種的支原體是需氧菌或兼性厭氧菌，但有些支原體喜歡微需氧條件（通過加入二氧化碳），或者喜歡嚴(yán)格厭氧。

致病性支原體菌株在35℃下生長最好，腐生菌株經(jīng)常在22-30℃下生長，T-支原體的最佳生長溫度是36℃.支原體屬在pH 7.4-8.0生長最好，但是T-支原體最適在pH 6.0-6.5.

技術(shù)要點：

瓊脂平板

使用Oxoid的支原體瓊脂基礎(chǔ)CM0041和添加劑SR0059制備好支原體瓊脂平板（常用55mm平板）以培養(yǎng)樣品。平板可在濕潤的需氧環(huán)境，厭氧環(huán)境和 10% CO₂-90% N₂環(huán)境中培養(yǎng)。在培養(yǎng)7天后，用60倍的顯微鏡查看瓊脂表面，并使用傾斜透射光。菌落特制是菌落表面中心會陷入，給人一種“煎雞蛋”的外觀形態(tài)。在進(jìn)行鑒定之前有必要使用再培養(yǎng)對菌株進(jìn)行純化。

雙向培養(yǎng)基

雙向培養(yǎng)基由1ml的支原體瓊脂基礎(chǔ)和2ml 支原體添加劑P組成，雙向培養(yǎng)基瓶可以與拭子或一小片痰一起35℃下培養(yǎng)最多3個月，任何由于真菌或者細(xì)菌的生長導(dǎo)致渾濁的培養(yǎng)基都必須被丟棄。

肺炎支原體的生長會發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，使亞甲基藍(lán)還原，并且使酚紅指示劑變黃色。出現(xiàn)這種顏色變化的培養(yǎng)基需要在瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)一步培養(yǎng)，可以用CM0401加SR0059C。

注意事項：

必須采取有效措施預(yù)防乙酸亞鉈中毒；
不要使用醋酸鉈培養(yǎng)基分離解脲支原體；
以下情況下可確證是否為支原體結(jié)果：
(1) 具有典型的形態(tài)
(2) 無血清介質(zhì)中無菌落生長
(3) 菌落嵌入瓊脂表面

更多該產(chǎn)品信息請見Oxoid網(wǎng)頁

支原體肉湯（Mycoplasma Broth）

用于從臨床樣本種選擇性分離培養(yǎng)支原體

貨號	產(chǎn)品描述	規(guī)格	可配制培養(yǎng)基	公開價
CM0403B CM1166B	支原體肉湯基礎(chǔ) Mycoplasma Broth Base	500g	19.6L	684元
SR0059C	支原體添加劑G Mycoplasma Supplement G	10小瓶	每小瓶80ml	1126元

               

支原體肉湯基礎(chǔ) CM0403，新貨號CM1166

配方表：

成分*	含量 g/L
細(xì)菌學(xué)蛋白胨	10.0
牛肉浸粉（Lab-Lemco粉）	10.0
氯化鈉	5.0
礦物質(zhì)	0.5
pH 7.8±0.2 @25℃

 *可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)需要自行調(diào)整

配制方法：

取25.5g的CM0403培養(yǎng)基到1L蒸餾水中，混勻溶解，分裝培養(yǎng)基，每瓶80ml，121℃滅菌15分鐘，冷卻到50℃，每瓶培養(yǎng)基加入1瓶已安裝說明書溶解的SR0059C。

注意事項：

乙酸亞鉈有毒，必須采取有效措施預(yù)防中毒。

當(dāng)肉湯中的指示劑發(fā)生顏色變化時，要立刻轉(zhuǎn)移到瓊脂上培養(yǎng)，以防pH的變化損害微生物。

該產(chǎn)品的具體信息請見Oxoid網(wǎng)頁